MTMR7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405863

Descripción general

MTMR7 codifica la proteína relacionada con miotubularina 7, una fosfatasa lipídica catalíticamente activa que desfosforila el fosfatidilinositol 3‑fosfato y el fosfatidilinositol (3,5)‑bisfosfato, modulando así el tráfico de membranas dependiente de fosfoinosítidos. Mediante la regulación de la dinámica endosomal, el reciclaje de receptores y la maduración de vesículas, MTMR7 contribuye al control de las salidas de señalización de vías como EGFR/MAPK y redes asociadas a PI3K. La actividad alterada de MTMR7 se ha vinculado a fenotipos de proliferación y migración celular desregulados, lo que respalda su relevancia en estudios de señalización oncogénica y homeostasis epitelial. Su papel en el recambio de fosfoinosítidos también se relaciona con procesos más amplios, como la autofagia y la función lisosomal, que con frecuencia se ven alterados en estados celulares asociados a enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MTMR7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MTMR7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MTMR7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MTMR7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MTMR7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MTMR7 para la investigación de la señalización de MTMR7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MTMR7 críticos para la función de MTMR7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MTMR7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MTMR7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MTMR7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MTMR7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MTMR7 (h) y el plásmido HDR MTMR7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MTMR7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MTMR7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.