MTF-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-411609

Übersicht

MTF2 (metal response element binding transcription factor 2) kodiert MTF-2, einen mit der Polycomb-Gruppe assoziierten Chromatinregulator, der an Programmen der transkriptionellen Repression beteiligt ist, welche die Linienfestlegung und die Stabilität von Zellzuständen steuern. MTF-2 ist mit der Funktion von PRC2 und der H3K27-Methylierungs-abhängigen Stilllegung an Entwicklungs-Loci verknüpft und beeinflusst dadurch die Chromatinzugänglichkeit sowie weitreichende genregulatorische Netzwerke. Über diese epigenetischen Mechanismen trägt MTF2 zur Kontrolle von Proliferation, Differenzierung und stressabhängigen transkriptionellen Outputs bei. Eine fehlregulierte MTF2-Aktivität wurde in Studien zur Krebsbiologie und zu Entwicklungsstörungen beschrieben, bei denen eine veränderte Polycomb-Targeting-Spezifität Genexpressionslandschaften stören kann.

Das MTF-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MTF2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MTF2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MTF2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MTF-2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MTF2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MTF-2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MTF2-Exone abzielen, die für die MTF-2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MTF2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MTF-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MTF-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MTF2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MTF-2 HDR-Plasmid (h) und MTF-2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MTF2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MTF2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.