Plásmido Doble Nickase (h) MTA3: sc-402739-NIC

La MTA3 humana (metastasis associated 1 family member 3) es un regulador asociado a la cromatina que funciona como componente del complejo NuRD (remodelación de nucleosomas y desacetilación), coordinando la remodelación dependiente de ATP con la desacetilación de histonas para modular programas transcripcionales. Al determinar la accesibilidad de potenciadores y promotores, MTA3 influye en procesos como el mantenimiento de la identidad celular, la proliferación y la diferenciación específica de linaje, en particular en contextos epiteliales. Las redes de represión/activación dependientes de MTA3, cuando se encuentran desreguladas, se han vinculado con alteraciones en la señalización de la transición epitelio–mesénquima y con cambios en firmas de expresión génica observadas en múltiples modelos relevantes para enfermedades. Como factor epigenético nuclear, MTA3 se estudia con frecuencia para conectar la remodelación de la cromatina con salidas de vías como la transcripción sensible a hormonas, la regulación del ciclo celular y los programas de respuesta al estrés.

MTA3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MTA3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MTA3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MTA3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MTA3 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.