MTA1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400942

Descripción general

MTA1 (metastasis associated 1) codifica un correagulador asociado a la cromatina y un componente clave del complejo NuRD (remodelación de nucleosomas y desacetilasa), que integra la remodelación de nucleosomas dependiente de ATP con la desacetilación de histonas para configurar programas transcripcionales. Mediante interacciones con HDAC1/2, CHD4 y factores de transcripción específicos de secuencia, MTA1 influye en la transición epitelio-mesenquimal, las respuestas al daño del ADN, la señalización de receptores hormonales y la regulación del ciclo celular. La expresión o actividad alteradas de MTA1 se han vinculado a la progresión tumoral y a fenotipos invasivos en múltiples tipos de cáncer, donde puede modular vías oncogénicas y de diferenciación. Como regulador nuclear del estado de la cromatina, MTA1 se estudia con frecuencia en la dinámica de represión/activación transcripcional, la plasticidad epigenética y los mecanismos de expresión génica asociados a la metástasis.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MTA1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MTA1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MTA1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MTA1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MTA1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MTA1 para la investigación de la señalización de MTA1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MTA1 críticos para la función de MTA1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MTA1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MTA1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MTA1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MTA1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MTA1 (h) y el plásmido HDR MTA1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MTA1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MTA1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.