Plásmido Doble Nickase (m) MR1: sc-420785-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)MR1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MR1 (m) y el plásmido de doble nickasa MR1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Mr1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) MR1 | sc-420785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) MR1 | sc-420785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La MR1 de ratón (proteína 1 relacionada con el MHC de clase I) es una molécula no clásica de presentación de antígenos que se une a pequeños ligandos derivados de metabolitos y los expone en la superficie celular para su reconocimiento por las células T invariantes asociadas a mucosas (MAIT). A través de este eje MR1–MAIT, MR1 contribuye a la vigilancia inmunitaria y a respuestas rápidas de citocinas en tejidos de barrera, conectando el estado metabólico celular con la activación de células T de tipo innato. La señalización dependiente de MR1 influye en programas inflamatorios y en las respuestas del huésped a metabolitos microbianos, lo que la hace relevante para estudios de infección, inmunidad mucosal y regulación inmunitaria en modelos de enfermedad inflamatoria. Las alteraciones en la presentación por MR1 y en la actividad de las células MAIT también se investigan en contextos de inmunología tumoral e inflamación metabólica para comprender cómo la disponibilidad de ligandos determina la función inmunitaria.
MR1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Mr1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Mr1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Mr1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Mr1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.