MO25 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404607
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MO25 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MO25, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MO25 Anticorpo (919I2G): sc-517655
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MO25 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404607 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CAB39 codifica a MO25, uma proteína de andaime conservada que estabiliza e ativa o complexo da quinase supressora tumoral LKB1 (STK11) juntamente com as pseudocinases STRAD. Por meio desse complexo, a MO25 sustenta a fosforilação de quinases da família AMPK, conectando o estado energético celular a vias que controlam o metabolismo, a polaridade celular, as respostas ao estresse e a regulação do crescimento. A sinalização dependente de MO25 influencia a organização epitelial e a dinâmica do citoesqueleto, processos frequentemente alterados na biologia do câncer e em modelos de disfunção metabólica. Assim, a atividade alterada do eixo LKB1–STRAD–MO25 é relevante para estudos de controle proliferativo, detecção de nutrientes e fenótipos associados à polaridade.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MO25 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CAB39 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CAB39, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CAB39 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MO25.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CAB39 para a investigação da sinalização de MO25, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CAB39 críticos para a função MO25
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CAB39 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MO25 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MO25 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CAB39. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MO25 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MO25 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CAB39 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CAB39 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.