Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MMS19 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405964
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MMS19 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MMS19, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MMS19 Anticuerpo (G-12): sc-390028
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MMS19 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405964 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MMS19 codifica MMS19, un factor conservado implicado en el mantenimiento del genoma a través de sus funciones en el ensamblaje citosólico de clústeres hierro–azufre (Fe–S) y en la maduración de proteínas nucleares dependientes de Fe–S implicadas en la replicación y la reparación del ADN. Al sostener la integridad funcional de múltiples enzimas del metabolismo del ADN, MMS19 contribuye a la tolerancia al estrés replicativo, a la señalización de la respuesta al daño del ADN y a la estabilidad cromosómica global. Por lo tanto, la alteración de MMS19 es relevante para las vías que salvaguardan la integridad del genoma y puede influir en la sensibilidad celular a estresores genotóxicos. Los procesos vinculados a MMS19 que se encuentran desregulados son de interés en estudios sobre acumulación de mutaciones, control de puntos de control (checkpoints) y mecanismos subyacentes a fenotipos de inestabilidad genómica observados en contextos asociados a enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MMS19 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MMS19 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MMS19 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MMS19 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MMS19.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MMS19 para la investigación de la señalización de MMS19, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MMS19 críticos para la función de MMS19
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MMS19 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MMS19 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MMS19 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MMS19. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MMS19 (h) y el plásmido HDR MMS19 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MMS19 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MMS19 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.