Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MMP9 Double Nickase Plasmid (m): sc-421679-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MMP9 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MMP9 Double-Nickase-Plasmid (m) und MMP9 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Mmp9 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: MMP9: sc-393859
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MMP9 Double Nickase Plasmid (m) | sc-421679-NIC | 20 µg | $410.00 |
Matrix-Metalloproteinase 9 (MMP9), kodiert durch das Mausgen *Mmp9*, ist eine sezernierte, zinkabhängige Endopeptidase, die Komponenten der extrazellulären Matrix abbaut und bioaktive Moleküle prozessiert, um den Gewebeumbau zu regulieren. Die MMP9-Aktivität überschneidet sich mit Signalwegen, die die Migration von Leukozyten, Zytokin- und Chemokingradienten, Angiogenese sowie Wundheilung steuern, und wird häufig im Kontext inflammatorischer Signalgebung und des Umsatzes der extrazellulären Matrix untersucht. Im Tumormikromilieu und bei chronischen Entzündungen kann eine veränderte *Mmp9*-Expression die Integrität der Basalmembran, die Infiltration von Immunzellen und die Gefäßpermeabilität beeinflussen. Eine Dysregulation von MMP9 wurde mit Mausmodellen für Krebsprogression, Arthritis, Neuroinflammation und fibrotischen Umbau in Verbindung gebracht, was MMP9 zu einem häufigen Ziel mechanistischer Studien zu matrixgetriebenen Phänotypen macht.
MMP9 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Mmp9-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Mmp9 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Mmp9-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Mmp9-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.