MMP-20 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405838

Descripción general

MMP20 codifica la metaloproteinasa de matriz 20 (MMP-20, enamelisina), una endopeptidasa dependiente de zinc especializada en la remodelación de la matriz extracelular, con una actividad destacada durante la formación del esmalte. Al escindir proteínas estructurales de la matriz y procesar componentes de la MEC, MMP-20 contribuye a una proteólisis regulada que coordina la maduración tisular y los procesos de mineralización. Su actividad se integra en vías más amplias reguladas por metaloproteinasas que modulan las interacciones célula–matriz, las cascadas de activación de proteasas y la dinámica de la señalización extracelular. La función desregulada de MMP20 se asocia con defectos en el desarrollo del esmalte y se ha estudiado en el contexto de cambios del microambiente tisular impulsados por la proteólisis, relevantes para la biología de enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MMP-20 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MMP20 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MMP20 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MMP20 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MMP-20.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MMP20 para la investigación de la señalización de MMP-20, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MMP20 críticos para la función de MMP-20
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MMP20 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MMP-20 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MMP-20 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MMP20. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MMP-20 (h) y el plásmido HDR MMP-20 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MMP20 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MMP20 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.