Plasmide Double Nickase (m) MMP-13: sc-421670-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) MMP-13 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MMP-13 Double Nickase (m) et le plasmide MMP-13 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Mmp13. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) MMP-13 | sc-421670-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) MMP-13 | sc-421670-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La métalloprotéinase matricielle 13 (MMP‑13), codée chez la souris par le gène *Mmp13*, est une endopeptidase sécrétée dépendante du zinc qui clive préférentiellement les collagènes fibrillaires et d’autres substrats de la matrice extracellulaire (MEC) afin de réguler le remodelage tissulaire. Son expression est induite par des cytokines inflammatoires et par la signalisation de facteurs de croissance, et s’inscrit dans des programmes transcriptionnels liés à MAPK/AP‑1 et à NF‑κB qui coordonnent le renouvellement de la MEC et la protéolyse péricellulaire. L’activité de MMP‑13 contribue à la dynamique de la matrice du cartilage et de l’os, au couplage ostéoclaste–ostéoblaste et aux processus de réparation des plaies, via la modulation de la dégradation du collagène et des signaux en aval dérivés de la matrice. Une dérégulation de *Mmp13* est fréquemment étudiée dans la dégénérescence musculosquelettique, le remodelage tissulaire inflammatoire et les interactions tumeur–stroma, où une composition altérée de la MEC influence la migration et l’invasion cellulaires.
MMP-13 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Mmp13 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Mmp13. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Mmp13. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Mmp13.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.