MLTK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405472
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MLTK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MLTK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MLTK Anticorpo (A-2): sc-390924
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MLTK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405472 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MAP3K20 codifica a quinase 20 da quinase quinase quinase de proteínas ativadas por mitógeno (MLTK), uma quinase a montante de serina/treonina que integra sinais de estresse e de desenvolvimento para modular a sinalização de MAPK. A MLTK tem sido associada à regulação das cascatas de JNK e p38, influenciando programas transcricionais que controlam proliferação, diferenciação e apoptose em resposta ao estresse celular. Por meio de comunicação cruzada com redes de quinases, a MAP3K20 pode moldar a sinalização inflamatória e a dinâmica do citoesqueleto, processos frequentemente alterados na transformação oncogênica e em outras patologias envolvendo atividade de MAPK desregulada. Assim, alterações na expressão ou na sinalização de MAP3K20 têm sido estudadas em contextos de biologia tumoral e de respostas adaptativas ao estresse relevantes para a pesquisa mecanística de doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MLTK (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MAP3K20 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MAP3K20, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MAP3K20 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MLTK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MAP3K20 para a investigação da sinalização de MLTK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MAP3K20 críticos para a função MLTK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MAP3K20 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MLTK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MLTK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MAP3K20. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MLTK Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MLTK (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MAP3K20 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MAP3K20 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.