Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Mitofilin: sc-403617-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Mitofilin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Mitofilin Double Nickase (h) et le plasmide Mitofilin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IMMT. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Mitofilin Antibody (D-3): sc-390707
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Mitofilin | sc-403617-NIC | 20 µg | $410.00 |
IMMT code la mitofiline, une protéine essentielle de la membrane interne mitochondriale et un composant central du complexe MICOS, qui organise les jonctions des crêtes et maintient l’ultrastructure mitochondriale. En façonnant l’architecture des crêtes, la mitofiline soutient l’efficacité de la phosphorylation oxydative, la diffusion des métabolites et l’assemblage correct des supercomplexes de la chaîne respiratoire, reliant ainsi IMMT à l’homéostasie bioénergétique et au contrôle qualité mitochondrial. L’organisation membranaire dépendante d’IMMT s’articule avec la dynamique mitochondriale et la signalisation du stress, influençant des processus tels que l’apoptose et la mitophagie. Le dérèglement du maintien des crêtes et de la fonction de MICOS est fréquemment étudié dans des contextes de dysfonction mitochondriale observée dans la neurodégénérescence, le stress cardiométabolique et le métabolisme des cellules cancéreuses.
Mitofilin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IMMT dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IMMT. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IMMT. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IMMT.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.