MGST2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431759

Descripción general

La glutatión S-transferasa microsomal 2 (MGST2), codificada por el gen murino *Mgst2*, es una enzima asociada a membrana que conjuga glutatión a intermediarios lipídicos reactivos y favorece la detoxificación celular bajo estrés oxidativo e inflamatorio. MGST2 participa en el metabolismo de eicosanoides, incluida la biosíntesis de leucotrieno C4, lo que la vincula a vías de señalización impulsadas por el ácido araquidónico que regulan el tono vascular, la función plaquetaria y la activación de células inmunitarias. Al modular la homeostasis redox y la producción de mediadores lipídicos, MGST2 puede influir en las respuestas de estrés mitocondrial y del retículo endoplásmico (RE), la integridad de membrana y programas transcripcionales proinflamatorios. La desregulación de la detoxificación dependiente de glutatión y de la señalización por leucotrienos es relevante en modelos de inflamación tipo asma, aterosclerosis y neuroinflamación, lo que convierte a *Mgst2* en un objetivo útil para estudios mecanísticos de redes lipídicas inflamatorias.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MGST2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Mgst2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Mgst2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Mgst2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MGST2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Mgst2 para la investigación de la señalización de MGST2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Mgst2 críticos para la función de MGST2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Mgst2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MGST2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MGST2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Mgst2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MGST2 (m) y el plásmido HDR MGST2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Mgst2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Mgst2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.