Plásmido Doble Nickase (h) MGC13057: sc-413610-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MGC13057 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MGC13057 (h) y el plásmido de doble nickasa MGC13057 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a C2orf88. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MGC13057 | sc-413610-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MGC13057 | sc-413610-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C2orf88 codifica la proteína poco caracterizada MGC13057, que se ha descrito como un regulador dependiente del contexto del estado celular epitelial y de programas transcripcionales asociados a la diferenciación. Los patrones de expresión vinculan a C2orf88 con vías que gobiernan la adhesión celular, la organización del citoesqueleto y la señalización del microambiente, lo que sugiere funciones en el mantenimiento de la arquitectura tisular y en la modulación de la expresión génica sensible al estrés. Se han observado niveles alterados de C2orf88 en múltiples conjuntos de datos tumorales y en contextos inflamatorios, lo que respalda su utilidad como un gen tipo biomarcador para estudiar mecanismos que conectan la plasticidad epitelial con fenotipos relevantes para la enfermedad. La perturbación funcional de MGC13057 puede ayudar a definir reguladores aguas arriba y efectores aguas abajo dentro de estas redes de remodelación y diferenciación.
MGC13057 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C2orf88 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C2orf88. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C2orf88. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C2orf88 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.