Plásmido Doble Nickase (m) METRNL: sc-431669-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)METRNL consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa METRNL (m) y el plásmido de doble nickasa METRNL (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Metrnl. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) METRNL | sc-431669-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) METRNL | sc-431669-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Metrnl codifica meteorina tipo (METRNL), una proteína secretada y glucosilada implicada en la señalización intercelular que coordina programas metabólicos e inflamatorios. En tejidos de ratón, la expresión de METRNL se ha vinculado al diálogo cruzado entre tejido adiposo e inmunidad, a la modulación de la polarización de macrófagos y a la regulación de la homeostasis energética en respuesta a estresores fisiológicos como la exposición al frío y el ejercicio. Entre las conexiones funcionales descritas se incluyen vías que influyen en la señalización de citocinas y en la remodelación de la matriz extracelular, lo que sitúa a METRNL como un nodo útil para estudiar el metabolismo sistémico y la adaptación tisular. La desregulación de la señalización asociada a METRNL se ha investigado en contextos de obesidad, resistencia a la insulina y fenotipos inflamatorios, lo que respalda la investigación mecanística de vías relevantes para enfermedades metabólicas.
METRNL El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Metrnl en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Metrnl. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Metrnl. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Metrnl alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.