Metaxin 3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-415611

Descripción general

MTX3 codifica la metaxina 3, un miembro de la familia de metaxinas implicado en la biología mitocondrial, incluida la organización de la membrana mitocondrial externa y la biogénesis de los complejos de importación de proteínas mitocondriales. Las metaxinas se asocian con procesos como el tráfico de proteínas mitocondriales, el mantenimiento de la integridad mitocondrial y la coordinación del metabolismo con las respuestas al estrés. La homeostasis mitocondrial alterada es una característica común en diversos contextos patológicos, lo que convierte a MTX3 en un locus útil para estudiar los mecanismos que conectan la dinámica mitocondrial con la supervivencia y la diferenciación celular. El análisis funcional de MTX3 puede ayudar a definir cómo las vías de importación mitocondrial influyen en la señalización posterior y en programas celulares dependientes de la energía.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Metaxin 3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MTX3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MTX3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MTX3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Metaxin 3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MTX3 para la investigación de la señalización de Metaxin 3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MTX3 críticos para la función de Metaxin 3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MTX3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Metaxin 3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Metaxin 3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MTX3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Metaxin 3 (h) y el plásmido HDR Metaxin 3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MTX3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MTX3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.