MEK Kinase 1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-401107-KO-2

Descripción general

MAP3K1 codifica la quinasa MEK 1 (MEKK1), una MAP quinasa quinasa quinasa de serina/treonina que actúa como regulador aguas arriba de la señalización MAPK activada por estrés. MEKK1 integra señales procedentes de citocinas, receptores de factores de crecimiento y perturbaciones del citoesqueleto para impulsar cascadas de fosforilación que conducen a la activación de JNK y p38, moldeando así programas transcripcionales que controlan la apoptosis, la diferenciación y las respuestas inflamatorias. Esta proteína también interactúa con la señalización dependiente de ubiquitina y con vías relacionadas con NF-κB, conectando complejos cercanos al receptor con la expresión génica aguas abajo. La desregulación de la señalización de MAP3K1 se ha asociado con decisiones alteradas del destino celular y con redes aberrantes de respuesta al estrés implicadas en contextos oncogénicos y del desarrollo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MEK Kinase 1 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MAP3K1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MAP3K1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MAP3K1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MEK Kinase 1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MAP3K1 para la investigación de la señalización de MEK Kinase 1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MAP3K1 críticos para la función de MEK Kinase 1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MAP3K1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MEK Kinase 1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MEK Kinase 1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MAP3K1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MEK Kinase 1 (h) y el plásmido HDR MEK Kinase 1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MAP3K1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MAP3K1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.