MEK Kinase 1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h2): sc-401107-KO-2

Panoramica

MAP3K1 codifica la MEK chinasi 1 (MEKK1), una MAP chinasi chinasi chinasi della famiglia delle serina/treonina che agisce come regolatore a monte della segnalazione MAPK attivata dallo stress. MEKK1 integra segnali provenienti da citochine, recettori di fattori di crescita e perturbazioni del citoscheletro per innescare cascate di fosforilazione che portano all’attivazione di JNK e p38, plasmando così programmi trascrizionali che controllano apoptosi, differenziamento e risposte infiammatorie. La proteina interagisce inoltre con la segnalazione dipendente dall’ubiquitina e con vie correlate a NF-κB, collegando complessi prossimali ai recettori all’espressione genica a valle. La disregolazione della segnalazione di MAP3K1 è stata associata ad alterazioni nelle decisioni sul destino cellulare e a reti anomale di risposta allo stress implicate in contesti oncogenici e dello sviluppo.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO MEK Kinase 1 (h2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MAP3K1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MAP3K1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MAP3K1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina MEK Kinase 1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MAP3K1 per lo studio della segnalazione di MEK Kinase 1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni MAP3K1 critici per la funzione di MEK Kinase 1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MAP3K1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal MEK Kinase 1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal MEK Kinase 1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MAP3K1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal MEK Kinase 1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR MEK Kinase 1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MAP3K1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MAP3K1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.