Plasmide Double Nickase (h) MCT8: sc-403824-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MCT8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MCT8 Double Nickase (h) et le plasmide MCT8 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC16A2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MCT8 | sc-403824-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MCT8 | sc-403824-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC16A2 code le transporteur de monocarboxylates 8 (MCT8), un transporteur des hormones thyroïdiennes à forte affinité et hautement spécifique, qui assure l’entrée et la sortie cellulaires de la triiodothyronine (T3) et de la thyroxine (T4). En régulant la disponibilité intracellulaire des hormones thyroïdiennes, MCT8 influence la signalisation via les récepteurs des hormones thyroïdiennes et les programmes transcriptionnels en aval qui contrôlent le neurodéveloppement, la différenciation neuronale et l’homéostasie métabolique. L’activité de MCT8 s’intègre aux processus de transport membranaire et à la signalisation endocrinienne pour façonner l’action des hormones thyroïdiennes de manière spécifique aux tissus. Les variations pathogènes de SLC16A2 sont associées à des phénotypes neurodéveloppementaux sévères et à une distribution altérée des hormones thyroïdiennes, ce qui en fait une cible clé pour les études mécanistiques du transport et de la signalisation des hormones thyroïdiennes.
MCT8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC16A2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC16A2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC16A2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC16A2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.