MCT12 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407365
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MCT12 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MCT12, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MCT12 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407365 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SLC16A12 codifica el transportador de monocarboxilatos 12 (MCT12), un transportador de membrana de la familia de transportadores de solutos 16 implicado en el movimiento transmembrana de pequeños ácidos orgánicos y metabolitos relacionados que contribuyen a la homeostasis metabólica celular. Al influir en la disponibilidad de sustratos a través de las membranas, MCT12 puede conectarse con vías que regulan el manejo de lactato/piruvato, el equilibrio redox y el acoplamiento metabólico entre compartimentos celulares. La alteración de la función de SLC16A12 se ha asociado con fenotipos oculares, incluida la catarata y cambios en la fisiología del cristalino, lo que respalda su relevancia para estudios de transporte epitelial, flujo de metabolitos y estrés metabólico específico de tejidos. Estas características convierten a SLC16A12 en un objetivo útil para analizar cómo el transporte de monocarboxilatos se integra con el metabolismo energético celular y con las funciones de barrera/epiteliales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MCT12 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC16A12 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC16A12 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC16A12 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MCT12.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC16A12 para la investigación de la señalización de MCT12, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SLC16A12 críticos para la función de MCT12
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC16A12 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MCT12 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MCT12 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC16A12. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MCT12 (h) y el plásmido HDR MCT12 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC16A12 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC16A12 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.