MBOAT2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426448

Descripción general

Mboat2 codifica la proteína 2 que contiene el dominio O-aciltransferasa unida a membrana (MBOAT2), una aciltransferasa asociada al retículo endoplásmico (RE) y a membranas, implicada en la remodelación de fosfolípidos mediante la reacilación de lisofosfolípidos. Al influir en la incorporación de acilos grasos en los glicerofosfolípidos de membrana, MBOAT2 puede afectar la composición de la membrana, la homeostasis de los orgánulos y procesos de señalización dependientes de lípidos vinculados a respuestas de estrés celular. La alteración del metabolismo de fosfolípidos es ampliamente relevante para la disfunción metabólica, la inflamación y la remodelación de membranas asociada al cáncer, lo que convierte a Mboat2 en un punto de entrada útil para estudios mecanísticos de fenotipos impulsados por lípidos. En sistemas murinos, la perturbación genética de Mboat2 permite análisis a nivel de vía de redes de aciltransferasas y de la remodelación lipídica compensatoria.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MBOAT2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Mboat2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Mboat2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Mboat2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MBOAT2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Mboat2 para la investigación de la señalización de MBOAT2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Mboat2 críticos para la función de MBOAT2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Mboat2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MBOAT2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MBOAT2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Mboat2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MBOAT2 (m) y el plásmido HDR MBOAT2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Mboat2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Mboat2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.