MBOAT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406397

Descripción general

MBOAT1 (membrane bound O-acyltransferase domain containing 1) codifica una aciltransferasa asociada al retículo endoplásmico implicada en la remodelación lipídica mediante la transferencia de grupos acilo de ácidos grasos a sustratos hidroxilados, lo que influye en la composición de los lípidos de membrana y en la homeostasis lipídica celular. Al modular el equilibrio de lípidos bioactivos y las propiedades de la membrana, MBOAT1 puede afectar procesos de señalización vinculados a la regulación metabólica, la función de los orgánulos y las respuestas celulares al estrés. La actividad alterada de aciltransferasas unidas a membrana se ha investigado en contextos como la dislipidemia, la señalización inflamatoria y la biología tumoral, donde los cambios en la composición lipídica pueden remodelar las vías de proliferación y supervivencia. Como resultado, MBOAT1 es una diana útil para desentrañar mecanismos impulsados por lípidos que acoplan la remodelación de membrana con fenotipos celulares posteriores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MBOAT1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MBOAT1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MBOAT1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MBOAT1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MBOAT1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MBOAT1 para la investigación de la señalización de MBOAT1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MBOAT1 críticos para la función de MBOAT1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MBOAT1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MBOAT1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MBOAT1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MBOAT1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MBOAT1 (h) y el plásmido HDR MBOAT1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MBOAT1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MBOAT1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.