Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) MBNL2: sc-401921-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MBNL2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MBNL2 (h) y el plásmido de doble nickasa MBNL2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MBNL2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MBNL2 Anticuerpo (3B4): sc-136167
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MBNL2 | sc-401921-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MBNL2 | sc-401921-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MBNL2 (regulador del empalme tipo muscleblind 2) es una proteína de unión a ARN que reconoce motivos YGCY para controlar el empalme alternativo, la localización del ARNm y su estabilidad a lo largo del desarrollo y la diferenciación tisular. En el núcleo coordina la selección de sitios de empalme y contribuye a redes de procesamiento de ARN que moldean la organización del citoesqueleto, la progresión del ciclo celular y programas de transcritos adaptativos al estrés. MBNL2 se estudia ampliamente en el contexto de la toxicidad asociada a repeticiones de ARN y de mecanismos de espliceopatía, donde la alteración de la actividad de la familia MBNL impulsa un empalme incorrecto generalizado. La desregulación del empalme dependiente de MBNL2 se ha relacionado con modelos de enfermedades neuromusculares y neurodegenerativas, lo que la convierte en un objetivo clave para dilucidar vías de procesamiento de ARN.
MBNL2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MBNL2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MBNL2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MBNL2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MBNL2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.