Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MBLAC2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406416
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MBLAC2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MBLAC2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MBLAC2 Anticuerpo (E-7): sc-398153
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MBLAC2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406416 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MBLAC2 codifica una proteína que contiene un dominio de metalo-β-lactamasa, implicada en reacciones hidrolíticas dependientes de metales y en procesos de desintoxicación celular. La actividad enzimática predicha sugiere que podría desempeñar un papel en la regulación del metabolismo de moléculas pequeñas y en el mantenimiento de la homeostasis celular bajo condiciones de estrés oxidativo o por xenobióticos. Se han descrito alteraciones en la expresión de miembros de la familia de las metalo-β-lactamasas en múltiples contextos de enfermedad, lo que respalda investigar a MBLAC2 en vías vinculadas a respuestas al estrés, reprogramación metabólica y supervivencia celular. Los estudios funcionales de MBLAC2 pueden aportar información sobre cómo los procesos asociados a metalo-hidrolasas se interrelacionan con las redes metabólicas mitocondriales y citosólicas en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MBLAC2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MBLAC2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MBLAC2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MBLAC2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MBLAC2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MBLAC2 para la investigación de la señalización de MBLAC2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MBLAC2 críticos para la función de MBLAC2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MBLAC2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MBLAC2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MBLAC2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MBLAC2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MBLAC2 (h) y el plásmido HDR MBLAC2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MBLAC2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MBLAC2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.