Plasmide Double Nickase (h) MAZ: sc-403775-NIC

MAZ (protéine à doigt de zinc associée à Myc) est un facteur de transcription se liant à l’ADN riche en GC, qui reconnaît des éléments de type « GA box » et module la transcription dépendante de l’ARN polymérase II au niveau des régions proximales des promoteurs. Il participe à la régulation de la progression du cycle cellulaire, des programmes de différenciation et de l’expression génique en réponse au stress, et peut influencer l’architecture de la chromatine via des interactions avec des cofacteurs transcriptionnels. MAZ a été associé au contrôle de l’expression d’oncogènes et de cytokines, notamment au sein de réseaux transcriptionnels liés à MYC, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la prolifération et de la signalisation inflammatoire. Une activité de MAZ dérégulée ou une utilisation altérée des promoteurs contrôlés par MAZ a été observée dans de multiples contextes cancéreux, et MAZ est également étudié en lien avec le remodelage transcriptionnel des voies métaboliques et immunitaires.

MAZ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAZ dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAZ. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAZ. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAZ.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.