Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) MAVS: sc-400769-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MAVS correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MAVS Double Nickase (h) et le plasmide MAVS Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAVS. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MAVS Antibody (E-3): sc-166583
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MAVS | sc-400769-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MAVS | sc-400769-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAVS (protéine de signalisation antivirale associée aux mitochondries) est un adaptateur associé aux mitochondries qui relie la détection cytosolique des ARN viraux par RIG-I (DDX58) et MDA5 (IFIH1) à la signalisation immunitaire innée en aval. Après activation, MAVS nucléise des complexes de signalisation qui déclenchent l’activation d’IRF3/IRF7 dépendante de TBK1/IKKε ainsi que la signalisation NF-κB canonique médiée par IKK, induisant des interférons de type I et des cytokines pro-inflammatoires. L’activité de MAVS est régulée par la dynamique mitochondriale et des modifications post-traductionnelles, intégrant les réponses au stress cellulaire à la défense antivirale. Une signalisation MAVS dérégulée a été impliquée dans une susceptibilité antivirale modifiée et des phénotypes inflammatoires pertinents pour la biologie des infections et les mécanismes des maladies à médiation immunitaire.
MAVS Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAVS dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAVS. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAVS. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAVS.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.