Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) MAT Iα: sc-405476-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MAT Iα correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MAT Iα Double Nickase (h) et le plasmide MAT Iα Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAT1A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MAT Iα | sc-405476-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MAT Iα | sc-405476-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAT1A code la méthionine adénosyltransférase I alpha (MAT Iα), une enzyme enrichie dans le foie qui catalyse la conversion de la méthionine et de l’ATP en S‑adénosylméthionine (SAM), principal donneur de groupements méthyle pour les réactions de méthylation de l’ADN, de l’ARN, des protéines et des lipides. En régulant la disponibilité intracellulaire de la SAM, MAT Iα relie le métabolisme de la méthionine et du « one‑carbon » à la régulation épigénétique, à l’homéostasie rédox et à la biosynthèse des polyamines. Une expression ou une activité altérée de MAT1A peut perturber le potentiel de méthylation et les flux métaboliques, des processus fréquemment étudiés dans le cadre de la dysfonction hépatique, de la reprogrammation métabolique et de phénotypes associés à la méthylation. Par conséquent, MAT1A est largement utilisée pour explorer les liens entre la détection des nutriments, l’état de la chromatine et les programmes transcriptionnels en aval dans les cellules humaines.
MAT Iα Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAT1A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAT1A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAT1A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAT1A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.