MAP-7 Double Nickase Plasmid (h): sc-411239-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MAP-7 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MAP-7 Double-Nickase-Plasmid (h) und MAP-7 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MAP7 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MAP-7 Double Nickase Plasmid (h) | sc-411239-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAP-7 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-411239-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAP7 kodiert das mikrotubuliassoziierte Protein 7 (MAP-7), einen mikrotubulistabilisierenden Faktor, der die Polymerisation und Organisation von Mikrotubuli unterstützt und den kinesin-1‑abhängigen Transport von Fracht fördert. Durch die Modulation der Mikrotubuli-Dynamik trägt MAP-7 zu intrazellulärem Transport, Zellpolarität und Prozessen des Zytoskelettumbaus bei, die das Neuritenwachstum und das Verhalten der mitotischen Spindel beeinflussen. Eine veränderte MAP7-Expression oder Mikrotubuli-Bindungsaktivität kann zytoskelettgetriebene Signal- und Transportnetzwerke stören und ist daher für Studien der Neurobiologie und proliferativer Zellzustände relevant. Als Regulator des Zytoskeletts wird MAP-7 häufig in Kontexten untersucht, in denen die Mikrotubuli-Stabilität mit Stressantworten, Differenzierungsprogrammen und krankheitsassoziierten Veränderungen der Zellarchitektur zusammenhängt.
MAP-7 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MAP7-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MAP7 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MAP7-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MAP7-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.