Partículas Lentivirales de Activación (h) MALT1: sc-400791-LAC

MALT1 (proteína 1 de translocación del linfoma del tejido linfoide asociado a mucosas) es una paracaspasa y proteína de andamiaje que acopla la señalización del receptor de antígeno a la activación de las vías de NF-κB y MAPK. Dentro del complejo CARD11–BCL10–MALT1 (CBM), promueve la señalización de la quinasa de IκB y escinde determinados sustratos para modular la activación de los linfocitos, la producción de citocinas y los programas de supervivencia celular. La señalización dependiente de MALT1 influye en la homeostasis inmunitaria y las respuestas inflamatorias, y la desregulación de este nodo se ha asociado con actividad aberrante de NF-κB en la biología linfoide. Como regulador de las salidas transcripcionales aguas abajo de la activación de receptores inmunitarios, MALT1 se estudia con frecuencia en modelos de reconfiguración de la señalización inmunitaria y de expresión génica adaptativa al estrés.

Las partículas de activación lentiviral MALT1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de MALT1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral MALT1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción MALT1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de MALT1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo MALT1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.