MALT1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-433761

Übersicht

Malt1 (MALT1) ist eine Paracaspase und ein Scaffold-Protein, das für die antigenrezeptorvermittelte Signalübertragung in Lymphozyten essenziell ist. Es wirkt innerhalb des CARD11–BCL10–MALT1-(CBM)-Komplexes, um die Rezeptoraktivierung mit der Aktivierung der NF-κB- und MAPK-Signalwege zu koppeln. Durch proteaseabhängige Spaltung mehrerer Signalregulatoren sowie proteaseunabhängige Scaffold-Funktionen trägt MALT1 dazu bei, Transkriptionsprogramme zu justieren, die die Aktivierung, Proliferation und Zytokinproduktion von Immunzellen steuern. In Mausmodellen stört eine veränderte Malt1-Aktivität die Immunhomöostase und wird häufig genutzt, um Mechanismen zu untersuchen, die Entzündungen, die Lymphozytendifferenzierung und immunvermittelte Pathologien zugrunde liegen. Aufgrund seiner Vernetzung in Signalwegen ist Malt1 zudem ein zentraler Knotenpunkt, um die Umstrukturierung von Signalnetzwerken in hämatopoetischen und immunologischen Zellkontexten zu analysieren.

Das MALT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Malt1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Malt1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Malt1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MALT1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Malt1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MALT1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Malt1-Exone abzielen, die für die MALT1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Malt1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MALT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom MALT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Malt1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MALT1 HDR-Plasmid (m) und MALT1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Malt1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Malt1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.