Plasmide Double Nickase (h) MagT1: sc-404484-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MagT1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MagT1 Double Nickase (h) et le plasmide MagT1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAGT1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MagT1 | sc-404484-NIC | 20 µg | $410.00 |
MAGT1 code pour MagT1, une protéine membranaire du réticulum endoplasmique impliquée dans l’homéostasie du magnésium et la glycosylation N‑liée en tant que sous-unité du complexe oligosaccharyltransférase. En soutenant la glycosylation co‑traductionnelle des protéines et le contrôle qualité, MagT1 influence la protéostasie de la voie sécrétoire ainsi que l’expression à la surface cellulaire de certains récepteurs immunitaires. Un dysfonctionnement de MAGT1 a été associé à des phénotypes d’immunodéficience, avec une signalisation lymphocytaire altérée et une susceptibilité à des réponses de stress cellulaire dérégulées, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la biologie des cellules immunitaires et des voies liées au RE. Dans les systèmes humains, la perturbation de MAGT1 est donc utilisée pour étudier la maturation des glycoprotéines, la signalisation dépendante des ions et les effets en aval sur le trafic des récepteurs.
MagT1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAGT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAGT1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAGT1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAGT1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.