Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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MAGE-A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401056
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MAGE-A1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MAGE-A1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MAGE-A1 Anticorpo (MA454): sc-20033
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MAGE-A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401056 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MAGEA1 codifica o MAGE-A1, um antígeno câncer-testículo normalmente restrito às células germinativas, mas frequentemente reexpresso em diversas neoplasias, nas quais pode contribuir para programas transcricionais e de proteostase associados ao tumor. O MAGE-A1 pertence à família MAGE do tipo I e está implicado em interações proteína–proteína que modulam vias dependentes de ubiquitina, incluindo a regulação da atividade de ligases E3 e a degradação (turnover) de componentes de sinalização. A expressão aberrante de MAGEA1 está associada a alterações no controle do ciclo celular, nas respostas ao estresse e em fenótipos de reconhecimento imunológico que moldam a biologia tumoral. Como antígeno com expressão restrita a linhagens, o MAGE-A1 também é amplamente utilizado como marcador molecular em estudos de imunogenicidade tumoral e de desrepressão epigenética.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MAGE-A1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MAGEA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MAGEA1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MAGEA1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MAGE-A1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MAGEA1 para a investigação da sinalização de MAGE-A1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MAGEA1 críticos para a função MAGE-A1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MAGEA1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MAGE-A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MAGE-A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MAGEA1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MAGE-A1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MAGE-A1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MAGEA1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MAGEA1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.