Plasmide Double Nickase (h) Ly-6K: sc-404264-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ly-6K correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ly-6K Double Nickase (h) et le plasmide Ly-6K Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LY6K. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ly-6K Antibody (G-11): sc-393560
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ly-6K | sc-404264-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Ly-6K | sc-404264-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LY6K code la protéine humaine de surface Ly-6K ancrée au glycosylphosphatidylinositol (GPI), membre de la superfamille Ly6/uPAR, impliquée dans la communication intercellulaire et la modulation de la signalisation proximale à la membrane. L’expression de Ly-6K a été associée à des modifications du comportement des cellules épithéliales, notamment la prolifération, la migration et l’invasion, ce qui concorde avec des rôles dans des voies intégrant la dynamique d’adhérence et la signalisation par facteurs de croissance à la membrane plasmique. Une expression dérégulée de LY6K est rapportée dans de nombreux types de tumeurs et est fréquemment étudiée comme marqueur de programmes oncogéniques et de phénotypes cellulaires agressifs. Ces propriétés font de LY6K une cible pertinente pour des études mécanistiques de la biologie tumorale, de la régulation de la signalisation membranaire et des états transcriptionnels associés au cancer.
Ly-6K Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LY6K dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LY6K. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LY6K. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LY6K.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.