LXR beta/NER/NR1H2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423617

Descripción general

Nr1h2 codifica el receptor X hepático beta (LXRβ/NER), un receptor nuclear activado por ligando que funciona como regulador transcripcional de la homeostasis de lípidos y colesterol. En células de ratón, LXRβ forma heterodímeros con RXR para modular genes que controlan el transporte inverso de colesterol, el metabolismo de ácidos grasos y programas génicos inflamatorios, integrando la señalización metabólica y de la inmunidad innata. Esta vía se cruza con la polarización de macrófagos, la biología de los adipocitos y las respuestas neuroinflamatorias, vinculando la actividad de Nr1h2 con mecanismos relevantes para la aterosclerosis, la disfunción metabólica y fenotipos inflamatorios del SNC en modelos experimentales. Debido a que LXRβ influye en redes transcripcionales en múltiples tejidos, la alteración de Nr1h2 se utiliza ampliamente para analizar la comunicación cruzada entre receptores nucleares y la regulación génica dependiente de ligandos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LXR beta/NER/NR1H2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nr1h2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nr1h2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nr1h2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LXR beta/NER/NR1H2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nr1h2 para la investigación de la señalización de LXR beta/NER/NR1H2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Nr1h2 críticos para la función de LXR beta/NER/NR1H2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nr1h2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LXR beta/NER/NR1H2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido LXR beta/NER/NR1H2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nr1h2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LXR beta/NER/NR1H2 (m) y el plásmido HDR LXR beta/NER/NR1H2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nr1h2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nr1h2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.