Plásmido Doble Nickase (m) LXR alpha/NR1H3: sc-423616-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)LXR alpha/NR1H3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LXR alpha/NR1H3 (m) y el plásmido de doble nickasa LXR alpha/NR1H3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Nr1h3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) LXR alpha/NR1H3 | sc-423616-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) LXR alpha/NR1H3 | sc-423616-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nr1h3 codifica el receptor X hepático alfa (LXRα/NR1H3), un receptor nuclear activado por ligando que heterodimeriza con RXR para regular programas transcripcionales que controlan el eflujo de colesterol, el metabolismo de los ácidos biliares y la síntesis de ácidos grasos. LXRα integra la detección de oxiesteroles con el manejo de lipoproteínas al modular dianas implicadas en el transporte reverso de colesterol y la homeostasis de esteroles, y se cruza con la señalización inflamatoria en macrófagos mediante mecanismos de transrepresión. En modelos murinos, la actividad alterada de Nr1h3 se ha utilizado para estudiar la dislipidemia, la biología de las células espumosas relevante para la aterosclerosis, la esteatosis hepática y la inflamación metabólica. Estas funciones convierten a NR1H3 en un nodo clave para investigar el crosstalk inmunometabólico entre el hígado, el tejido adiposo y los compartimentos de la inmunidad innata.
LXR alpha/NR1H3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Nr1h3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Nr1h3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Nr1h3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Nr1h3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.