Plásmido Doble Nickase (m) LSm11: sc-428300-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)LSm11 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LSm11 (m) y el plásmido de doble nickasa LSm11 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Lsm11. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) LSm11 | sc-428300-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) LSm11 | sc-428300-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Lsm11 del ratón codifica LSm11, un componente central de la ribonucleoproteína nuclear pequeña U7 (snRNP), especializada en el procesamiento del extremo 3′ de los pre-ARNm de histonas dependientes de la replicación. A través de su participación en la vía de procesamiento del ARN de histonas dependiente de U7, LSm11 ayuda a garantizar la maduración adecuada de los transcritos de histonas, acoplando la progresión de la fase S con el ensamblaje de la cromatina y la estabilidad del genoma. Se espera que la alteración de la función de LSm11 perturbe la homeostasis del ARNm de histonas, con efectos posteriores sobre las respuestas al estrés de replicación del ADN y la regulación del ciclo celular. Estos procesos son ampliamente relevantes para fenotipos proliferativos y para estudios mecanísticos del mantenimiento de la cromatina y la integridad genómica en modelos celulares de ratón.
LSm11 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Lsm11 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Lsm11. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Lsm11. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Lsm11 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.