LRRN1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421471

Übersicht

Leucine rich repeat neuronal 1 (LRRN1; Lrrn1) kodiert ein Single-Pass-Membranprotein, das in neuralem Gewebe angereichert ist und mit Zell‑Zell‑Interaktionen sowie neuritenassoziierten Prozessen in Verbindung gebracht wird. Über seine extrazellulären Leucin‑reichen Repeat-Domänen wird angenommen, dass LRRN1 adhäsionsabhängige Signalwege, neuronale Differenzierung und die Gewebemusterbildung während der Entwicklung beeinflusst, mit Bezügen zu Signalwegen, die die Membranorganisation sowie synaptische Programme oder Axonleitungsprogramme steuern. Veränderte LRRN1-Expression wurde in mehreren krebsbezogenen transkriptomischen Datensätzen berichtet, was Untersuchungen zu möglichen Beiträgen zu Proliferation, Migration und Differenzierungszuständen unterstützt, ohne dabei einen klinischen Nutzen zu implizieren. In Mausmodellen bietet eine Perturbation von Lrrn1 ein gut handhabbares Modell, um zu untersuchen, wie LRRN1 Entwicklungsphänotypen und Signalausgaben in Neuronen und anderen LRRN1-exprimierenden Zelltypen prägt.

Das LRRN1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Lrrn1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Lrrn1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Lrrn1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die LRRN1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Lrrn1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der LRRN1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Lrrn1-Exone abzielen, die für die LRRN1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Lrrn1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom LRRN1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom LRRN1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Lrrn1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das LRRN1 HDR-Plasmid (m) und LRRN1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Lrrn1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Lrrn1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.