LRCH4 Plasmide Double Nickase (h): sc-405444-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LRCH4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LRCH4 Double Nickase Plasmid (h) e il LRCH4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LRCH4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LRCH4 Antibody (A-9): sc-377441
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LRCH4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405444-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LRCH4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405444-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LRCH4 (leucine-rich repeats and calponin homology domain containing 4) codifica una proteina citosolica caratterizzata da domini LRR e simili a CH, comunemente associati a interazioni proteina–proteina e all’organizzazione del citoscheletro. Evidenze emergenti collegano i membri della famiglia LRCH alla regolazione della dinamica dell’actina, del traffico di membrana e della segnalazione dell’immunità innata, con LRCH4 implicata nella modulazione di vie infiammatorie prossimali al recettore, come le risposte mediate da TLR. Attraverso questi processi, LRCH4 può influenzare la motilità cellulare, l’adesione e programmi trascrizionali sensibili allo stress in contesti immunitari ed epiteliali. Una segnalazione infiammatoria disregolata e il rimodellamento del citoscheletro sono caratteristiche ricorrenti nei disturbi immunomediati e nella biologia del cancro, rendendo LRCH4 un bersaglio utile per studi meccanicistici delle vie di segnalazione.
LRCH4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LRCH4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LRCH4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LRCH4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LRCH4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.