Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LOXL3 Plasmide Double Nickase (h): sc-402967-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LOXL3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LOXL3 Double Nickase Plasmid (h) e il LOXL3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LOXL3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LOXL3 Antibody (E-6): sc-377216
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LOXL3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402967-NIC | 20 µg | $410.00 |
LOXL3 (lysyl oxidase like 3) codifica un’ammina ossidasi rame-dipendente che catalizza la deaminazione ossidativa dei residui di lisina, promuovendo la reticolazione covalente di collagene ed elastina e definendo l’architettura della matrice extracellulare. Attraverso la regolazione della rigidità e del rimodellamento della matrice, LOXL3 influenza l’adesione e la migrazione cellulare, nonché l’integrità tissutale, intersecando vie legate a fibrosi, riparazione delle ferite e plasticità epitelio-mesenchimale. Un’alterata espressione o attività di LOXL3 è stata associata a una modificata omeostasi della matrice extracellulare in diversi contesti patologici, inclusi il rimodellamento del microambiente tumorale e le patologie fibrotiche. Nei modelli cellulari umani, LOXL3 è spesso studiato per i suoi ruoli nella maturazione del collagene, nella meccanotrasduzione e nella segnalazione dipendente dal microambiente.
LOXL3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LOXL3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LOXL3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LOXL3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LOXL3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.