Loricrin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402452-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LoricrinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Loricrin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Loricrin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LOR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Loricrin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402452-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Loricrin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402452-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O LOR humano codifica a loricrina, uma proteína estrutural altamente abundante do envelope córneo da epiderme, que se torna amplamente reticulada por transglutaminases durante a diferenciação terminal dos queratinócitos. A loricrina contribui para a formação da barreira do estrato córneo, para a resistência mecânica e para o controlo da hidratação, integrando-se em programas de cornificação coordenados pela sinalização do cálcio, por redes de queratinização e pela regulação de genes do complexo de diferenciação epidérmica. Alterações na expressão de LOR ou na montagem do envelope estão associadas a défice da função de barreira e a fenótipos cutâneos inflamatórios, e variantes patogénicas na loricrina têm sido associadas a doenças hereditárias da queratinização, como a síndrome de Vohwinkel e a eritroqueratodermia simétrica progressiva. Como gene associado à barreira, o LOR é frequentemente estudado em modelos de respostas da epiderme ao stress, reparação de feridas e remodelação transcricional dependente da diferenciação.
Loricrin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LOR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LOR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LOR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LOR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.