Plásmido Doble Nickase (h) Loricrin: sc-402452-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Loricrin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Loricrin (h) y el plásmido de doble nickasa Loricrin (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a LOR. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Loricrin | sc-402452-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Loricrin | sc-402452-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **LOR** codifica la loricrina, una proteína estructural muy abundante de la envoltura cornificada de la epidermis que se entrecruza extensamente mediante transglutaminasas durante la diferenciación terminal de los queratinocitos. La loricrina contribuye a la formación de la barrera del estrato córneo, a la resistencia mecánica y al control de la hidratación, integrándose con los programas de cornificación coordinados por la señalización de calcio, las redes de queratinización y la regulación génica del complejo de diferenciación epidérmica. Las alteraciones en la expresión de **LOR** o en el ensamblaje de la envoltura se han vinculado con una función de barrera deteriorada y fenotipos cutáneos inflamatorios, y las variantes patogénicas en loricrina se han asociado con trastornos hereditarios de la queratinización como el síndrome de Vohwinkel y la eritroqueratodermia simétrica progresiva. Como gen asociado a la barrera, **LOR** se estudia con frecuencia en modelos de respuestas al estrés epidérmico, reparación de heridas y remodelación transcripcional dependiente de la diferenciación.
Loricrin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LOR en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LOR. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LOR. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LOR alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.