Plásmido Doble Nickase (h) LOC729991-MEF2B: sc-405289-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LOC729991-MEF2B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LOC729991-MEF2B (h) y el plásmido de doble nickasa LOC729991-MEF2B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BORCS8-MEF2B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LOC729991-MEF2B | sc-405289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) LOC729991-MEF2B | sc-405289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BORCS8-MEF2B codifica un producto proteico quimérico BORCS8–MEF2B (LOC729991-MEF2B) que vincula un componente del complejo BORC, el cual regula el posicionamiento de los lisosomas y el transporte impulsado por kinesina, con MEF2B, un factor de transcripción con caja MADS implicado en la regulación génica dependiente de la actividad. La señalización de la familia MEF2 integra señales de calcio/MAPK para controlar programas transcripcionales que rigen la proliferación, la diferenciación y las respuestas al estrés, mientras que el tráfico asociado a BORC influye en la autofagia y la homeostasis endolisosomal. La desregulación de MEF2B se ha asociado con un control transcripcional alterado en la biología linfoide, incluidas alteraciones genómicas recurrentes descritas en neoplasias de células B, lo que convierte a este locus en un elemento relevante para dilucidar el crosstalk entre transcripción y tráfico en contextos celulares pertinentes para la enfermedad.
LOC729991-MEF2B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BORCS8-MEF2B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BORCS8-MEF2B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BORCS8-MEF2B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BORCS8-MEF2B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.