Plásmido Doble Nickase (h) LOC285636: sc-415435-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LOC285636 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LOC285636 (h) y el plásmido de doble nickasa LOC285636 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a C5orf51. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LOC285636 | sc-415435-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) LOC285636 | sc-415435-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C5orf51 codifica la proteína humana LOC285636, un producto génico caracterizado de manera incompleta y con una anotación funcional limitada en las bases de datos actuales de rutas biológicas. La evidencia genómica y transcriptómica disponible sugiere una expresión dependiente del contexto, lo que respalda investigar posibles funciones en redes de regulación génica, el mantenimiento del estado celular y programas específicos de linaje. Dado que los loci de marcos de lectura abiertos poco caracterizados pueden influir de forma indirecta en el procesamiento de ARN, la regulación asociada a la cromatina o la proteostasis, suelen emplearse estudios de perturbación para vincular LOC285636 con procesos celulares definidos. El perfilado de la alteración de LOC285636 en sistemas modelo relevantes puede ayudar a asociar este locus con firmas moleculares observadas en fenotipos relevantes para enfermedades, sin implicar resultados clínicos.
LOC285636 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C5orf51 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C5orf51. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C5orf51. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C5orf51 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.