LOC147645 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406583

Descripción general

VSIG10L (LOC147645) codifica una proteína predicha que contiene un dominio V-set y dominios de inmunoglobulina, y se espera que se localice en la superficie celular y participe en interacciones célula–célula o célula–matriz. En función de su arquitectura de dominios y de la homología con otros miembros de la superfamilia de las inmunoglobulinas, se ha implicado a VSIG10L en programas de adhesión epitelial y en la regulación de la arquitectura tisular, procesos que se relacionan con la diferenciación, la función de barrera y las redes de señalización migratoria. La variación en la expresión de proteínas relacionadas con dominios Ig se vincula con frecuencia a interacciones alteradas con el microambiente tumoral y a rasgos metastásicos, lo que convierte a VSIG10L en un candidato para estudios mecanísticos en biología del cáncer y remodelación epitelial. Por tanto, la evaluación funcional de LOC147645 puede aportar información sobre las vías que gobiernan la señalización dependiente de la adhesión y la plasticidad fenotípica celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LOC147645 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen VSIG10L en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del VSIG10L junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de VSIG10L tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LOC147645.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en VSIG10L para la investigación de la señalización de LOC147645, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de VSIG10L críticos para la función de LOC147645
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de VSIG10L para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LOC147645 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LOC147645 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus VSIG10L. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LOC147645 (h) y el plásmido HDR LOC147645 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología VSIG10L para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana VSIG10L definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.