LMTK3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403191

Übersicht

LMTK3 (Lemur-Tyrosinkinase 3) kodiert eine membranassoziierte Serin/Threonin-Kinase, die an der Regulation intrazellulärer Signalwege und vesikulärer Transportprozesse beteiligt ist, welche den Rezeptorumsatz und die Signaldauer beeinflussen. In epithelialen Kontexten wurde LMTK3 mit der Modulation kinasegesteuerter Transkriptionsprogramme sowie mit einer wechselseitigen Beeinflussung der Signalübertragung von Hormonrezeptoren in Verbindung gebracht, wodurch Zellproliferation und Stressantworten geprägt werden. Eine veränderte Expression oder Aktivität von LMTK3 wurde in mehreren krebsrelevanten Zusammenhängen beschrieben, in denen sein Einfluss auf die Reaktionsfähigkeit auf Wachstumsfaktoren, Überlebenssignale und therapieassoziierte Resistenzphänotypen untersucht wird. Daher ist LMTK3 ein nützliches Ziel, um die Verschaltung von Kinase-Netzwerken, die Dynamik endomembranöser Kompartimente und nachgeschaltete transkriptionelle Outputs in humanen Modellsystemen zu analysieren.

Das LMTK3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des LMTK3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des LMTK3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von LMTK3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die LMTK3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von LMTK3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der LMTK3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf LMTK3-Exone abzielen, die für die LMTK3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere LMTK3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom LMTK3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom LMTK3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des LMTK3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das LMTK3 HDR-Plasmid (h) und LMTK3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von LMTK3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten LMTK3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.