Plásmido Doble Nickase (h) LMO7: sc-404373-NIC

LMO7 (proteína 7 que contiene únicamente dominios LIM) es una proteína andamiaje multifuncional que se localiza en las uniones célula–célula, el citoesqueleto de actina y el núcleo, donde ayuda a coordinar la organización del citoesqueleto, la mecanotransducción y programas transcripcionales vinculados a la integridad epitelial. Al interactuar con complejos de unión y complejos asociados a la actina, LMO7 contribuye a la regulación de la forma celular, la remodelación de la adhesión y la señalización sensible al estrés que influye en la diferenciación y la arquitectura tisular. La actividad alterada de LMO7 se ha asociado con defectos en la función de barrera y en la dinámica del citoesqueleto, y su desregulación está implicada en contextos que involucran transiciones epitelio–mesénquima, comportamiento invasivo y remodelación asociada a tumores. Estas características hacen de LMO7 una diana útil para estudiar la señalización dependiente de la adhesión, la comunicación citoesqueleto–núcleo y la homeostasis de las uniones en modelos de células humanas.

LMO7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LMO7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LMO7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LMO7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LMO7 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.