LLH1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422311

개요

Plod1은 소포체(endoplasmic reticulum)에 존재하는 효소인 리실 하이드록실레이스 1(LLH1)을 암호화하며, 이 효소는 프로콜라겐의 특정 라이신 잔기를 하이드록실화해 이후의 당화(glycosylation)를 가능하게 하고 콜라겐 가교결합(cross-linking)을 안정화합니다. LLH1은 콜라겐 성숙과 세포외기질(ECM) 조직화를 조절함으로써 결합조직의 완전성, 기저막 구조, 그리고 조직 리모델링 경로에 영향을 줍니다. Plod1 활성의 교란은 비정상적인 콜라겐 섬유형성(fibrillogenesis)과 기질 역학적 특성과 연관되며, 이는 섬유화 생물학, 혈관 및 피부 취약성 표현형, 그리고 마우스 모델에서의 종양 미세환경 연구와 관련된 과정들입니다. 따라서 Plod1은 ECM 주도 신호전달, 세포–기질 상호작용, 그리고 기계적 신호전달(mechanotransduction) 맥락에서 흔히 연구됩니다.

LLH1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Plod1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Plod1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Plod1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 LLH1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 LLH1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Plod1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• LLH1 기능에 중요한 Plod1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Plod1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• LLH1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 LLH1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Plod1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  LLH1 HDR 플라스미드 (m) 및 LLH1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Plod1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Plod1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.