Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) LKB1: sc-400313-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LKB1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LKB1 Double Nickase (h) et le plasmide LKB1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant STK11. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LKB1 Antibody (Ley 37D/G6): sc-32245
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LKB1 | sc-400313-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LKB1 | sc-400313-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STK11 code la kinase sérine/thréonine LKB1, un régulateur majeur de l'homéostasie énergétique cellulaire qui active l'AMPK ainsi qu'une famille de kinases apparentées à l'AMPK afin de coordonner le métabolisme, l'autophagie et les réponses au stress. Par ces voies, LKB1 module la signalisation mTOR, la polarité cellulaire et l'organisation épithéliale, reliant la détection des nutriments au contrôle de la croissance. LKB1 influence également la progression du cycle cellulaire et maintient l'architecture génomique et tissulaire en intégrant des signaux qui affectent la prolifération et la différenciation. Des altérations avec perte de fonction de STK11 sont récurrentes dans les cancers humains et s'associent à une reprogrammation métabolique et à une perturbation des programmes de polarité, faisant de cet axe un élément central des études sur la biologie tumorale et la régulation des états cellulaires.
LKB1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus STK11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de STK11. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de STK11. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de STK11.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.