Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Limd1 Antibody (H-4): sc-271448. Western blot analysis of Limd1 expression in WEHI-231 (A) and c4 (B) whole cell lysates.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Limd1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-424343
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Limd1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Limd1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Limd1: sc-271448，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Limd1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-424343 | 20 µg | $397.00 |
概述
LIM 结构域含有蛋白 1（Limd1）是一种支架蛋白，定位于黏着斑（focal adhesions）和细胞–细胞连接处，通过协调蛋白–蛋白相互作用来塑造细胞骨架组织与力学信号转导（mechanotransduction）。Limd1 参与调控细胞黏附、迁移和生长控制等通路，并被认为可通过影响 LATS 活性及 YAP/TAZ 的定位、从而经由相关相互作用调节 Hippo/YAP 信号。在小鼠体系中，Limd1 有助于研究组织稳态与发育程序中那些依赖黏附的关键信号过程。与 LIMD1 相关网络的失调与抑癌生物学及转移相关表型密切相关，包括侵袭能力改变以及类似上皮–间质转化（EMT）的过程。
Limd1 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Limd1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Limd1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Limd1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Limd1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Limd1缺失的细胞模型，用于Limd1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Limd1 功能至关重要的 Limd1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Limd1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Limd1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Limd1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Limd1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Limd1 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Limd1 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Limd1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Limd1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。