LAPTM4B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408254-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LAPTM4BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LAPTM4B (h) e o Plasmídeo Double Nickase LAPTM4B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LAPTM4B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LAPTM4B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408254-NIC | 20 µg | $410.00 |
LAPTM4B (proteína lisossomal transmembrana 4 beta) é uma proteína de membrana lisossomal/endossomal de múltiplas passagens que regula o tráfego intracelular, a sinalização associada aos lisossomos e a dinâmica de membranas. Ela participa de processos de transporte endolisossomal que influenciam a renovação de receptores e vias downstream, como PI3K/AKT e a homeostase da autofagia–lisossomo, impactando respostas ao estresse celular e o sensoriamento de nutrientes. A expressão alterada de LAPTM4B tem sido associada a mudanças na proliferação, invasão e no manejo de fármacos em múltiplos contextos tumorais, tornando-a um alvo relevante para dissecar mecanismos centrados nos lisossomos em modelos de doença. Em células humanas, LAPTM4B também é estudada por seus papéis na organização vesicular e na modulação de saídas de sinalização a partir de receptores internalizados.
LAPTM4B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LAPTM4B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LAPTM4B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LAPTM4B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LAPTM4B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.