Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plásmido Doble Nickase (m) Lamin B2: sc-421446-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Lamin B2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Lamin B2 (m) y el plásmido de doble nickasa Lamin B2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Lmnb2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Lamin B2 Anticuerpo (F-8): sc-377379
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Lamin B2 | sc-421446-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Lamin B2 | sc-421446-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Lmnb2** codifica la **lamina B2**, un filamento intermedio central de la lámina nuclear que proporciona soporte estructural a la envoltura nuclear y ayuda a organizar la cromatina periférica. La lamina B2 participa en la arquitectura nuclear, en la sincronización de la replicación del ADN y en el reensamblaje mitótico de la envoltura nuclear, vinculando la dinámica de la lámina con la progresión del ciclo celular y la estabilidad del genoma. A través de interacciones con los dominios asociados a la lámina, contribuye a la regulación transcripcional y a la organización de la cromatina de orden superior. La desregulación de la lamina B2 y de componentes relacionados de la lámina es relevante para las laminopatías y para mecanismos más amplios de fragilidad nuclear, programas de expresión génica alterados y respuestas al estrés, estudiados en contextos del desarrollo y degenerativos.
Lamin B2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Lmnb2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Lmnb2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Lmnb2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Lmnb2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.