Plasmide CRISPR/Cas9 KO L-type Ca++ CP γ3 (h): sc-406760
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- L-type Ca++ CP γ3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique L-type Ca++ CP γ3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: L-type Ca++ CP γ3 Antibody (A-07): sc-81889
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO L-type Ca++ CP γ3 (h) | sc-406760 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CACNG3 code la sous-unité auxiliaire γ3 des canaux calciques de type L (Ca++) chez l’humain, une protéine régulatrice transmembranaire qui module le trafic et les propriétés biophysiques des canaux calciques voltage‑dépendants de type L. En ajustant l’entrée de calcium, γ3 influence l’excitabilité membranaire, le couplage stimulus–sécrétion et des programmes de transcription dépendants du calcium qui façonnent la signalisation neuronale et musculaire. La régulation des canaux liée à CACNG3 s’inscrit à l’interface de voies dépendantes de Ca2+ telles que la signalisation calmoduline/CaMK et calcineurine–NFAT, avec des effets sur la plasticité synaptique et l’expression génique dépendante de l’activité. Des altérations de l’expression de CACNG3 ou de la composition du complexe canal ont été explorées dans des études portant sur des phénotypes neuropsychiatriques et des troubles liés à l’excitabilité, où une homéostasie calcique perturbée constitue un thème mécanistique commun.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO L-type Ca++ CP γ3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CACNG3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CACNG3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CACNG3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine L-type Ca++ CP γ3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CACNG3 pour l'étude de la signalisation de L-type Ca++ CP γ3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CACNG3 essentiels à la fonction de L-type Ca++ CP γ3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CACNG3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le L-type Ca++ CP γ3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le L-type Ca++ CP γ3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CACNG3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le L-type Ca++ CP γ3 plasmide HDR (h) et le L-type Ca++ CP γ3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CACNG3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CACNG3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.